細胞工程技術誘導細胞融合

1. 4，誘導細胞融合的方法有哪些

在體外培養條件下，動物細胞會自發融合，但是頻率極低。因此，一般都需要添加具有誘導細胞融合效應的生物或化學葯劑，或者採用電融合技術，人為地促進細胞融合。

1.病毒誘導融合

病毒是最早採用的融合劑。常用於誘導動物細胞融合的病毒有仙台病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等，其中仙台病毒最常用。用作融合劑的病毒必須事先用紫外線或β-丙內酯滅活，使病毒的感染活性喪失而保留病毒的融合活性。

2.用滅活的仙台病毒誘導細胞融合的

優點：融合率較高，對各種動物細胞都適宜，且仙台病毒能在雞胚中大量繁殖，容易培養；

缺點：仙台病毒不穩定，在保存過程中融合活性會降低，並且制備過程比較煩瑣。此外，病毒引進細胞後，可能會對細胞的生命活動產生干擾。

3.聚乙二醇PEG誘導融合

聚乙二醇PEG具有強烈的吸水性以及凝聚和沉澱蛋白質的作用，能夠有效地促進植物原生質體和動物細胞的融合。在不同種類的動物細胞混合液中加入聚乙二醇，就會發生細胞凝集作用；在稀釋和除去聚乙二醇的過程中，就會發生細胞融合。聚乙二醇誘導細胞融合的機理，目前還不太清楚。聚乙二醇是化學試劑，使用起來很方便，誘導細胞融合的頻率比較高，但是它有一定毒性，對有些細胞(如卵細胞)不適用。

4.電融合

20世紀80年代建立起來的電融合技術，是將兩種細胞的混合液置於低壓交流電場中，使細胞聚集成串珠狀，然後施加高壓電脈沖，以促使細胞融合。緊密排列的細胞，在相互接觸的細胞膜之間會出現無蛋白顆粒的脂質區，當受到電擊時，這個區域就會被擊穿，產生脂雙層膜孔，導致細胞之間的細胞質連通，進而發生細胞融合。電融合技術有許多優點，如誘導細胞融合的頻率高，對細胞無毒害作用，操作簡便，可重復性好。

資料拓展：

19世紀30年代，科學家們相繼在肺結核，天花，水痘，麻疹等疾病患者的病理組織中觀察到多核細胞。

19世紀70年代，科學家們在蛙的血細胞中也看到了多核細胞的現象細胞融合，但是當時科學發展水平的限制，沒有給予足夠重視。

1962年，日本科學家發現日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤細胞融合的現象。

1965年，英國科學家進一步證實了滅活的病毒在適當的條件下也可以誘發動物細胞融合。

後來科學家又成功誘導了不同種動物的體細胞融合，並且能將雜種細胞培養成活。細胞融合技術不斷改進，現在已廣泛應用於細胞學，遺傳學，免疫學，病毒學等多種學科的研究工作中。

2. 細胞工程中細胞融合的標志是什麼

應該是細胞的再程序化

包括：核膜破裂，染色體凝集。

3. 誘導細胞融合的三種方法和形式（希望朝大學細胞工程方向回答）謝謝！

物理：離心、振動、電刺激；化學：聚乙二醇【PEG】；生物：滅活的仙台病毒。

4. 為什麼細胞工程中滅活的病毒可以用來誘導動物細胞融合而不用於去壁的植物細胞

滅活的病毒被膜中有融合蛋白（fusion protein），可介導病毒同宿主細胞融合，也可介導細胞與細胞的融合，因此可以用紫外線滅活的此類病毒誘導細胞融合

5. 下列關於細胞工程的敘述，錯誤的是（）A．電刺激可誘導植物原生質體融合或動物細胞融合B．去除植物細

A．電刺激可誘導植物原生質體融合或動物細胞融合，體現細胞膜的流動性，故A正確；
B．纖維素酶或者果膠酶去除植物細胞的細胞壁，用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶處理，將動物組織分散成單個細胞，故B正確；
C．小鼠骨髓瘤細胞和經抗原免疫小鼠的B淋巴細胞融合形成的雜交瘤細胞，即能無限繁殖，又能產生特異性抗體，故C正確；
D．甲染色體數目2M，乙為2N，體細胞雜種染色體數目為2M+2N，甲乙兩品種雜交後代的染色體數目為M+N，故D錯誤．
故選：D．

6. 下列關於細胞工程的有關敘述，不正確的是（）A．動物細胞融合與植物體細胞雜交相比，誘導融合的方法

A、動物細胞融合與植物體細胞雜交相比，誘導融合的方法、所用的技術手段、所依據的原理均不完全相同，動物細胞融合不能形成雜種個體，而植物細胞融合能形成雜種個體，但兩者都能形成雜種細胞，故A錯誤；
B、由根尖細胞脫分化形成愈傷組織的過程中，細胞不發生分化，但細胞通過有絲分裂方式進行增殖，在有絲分裂間期可能會發生基因突變，在細胞分裂期可能會發生染色體變異，但不會發生基因重組，因為基因重組發生在減數分裂過程中，故B正確；
C、利用花葯離體培養得到單倍體植株，從紫草的愈傷組織中提取紫草素，利用細胞工程培育「番茄-馬鈴薯」雜種植株，都利用了植物組織培養技術，而利用秋水仙素處理萌發的種子或幼苗得到多倍體植株屬於自然生長過程，該過程中沒有採用植物組織培養技術，故C正確；
D、「試管嬰兒」實質上就是「體外受精」、早期胚胎培養和「胚胎移植」的「產物」，無法使不能產生精子或卵細胞的夫婦能得到自己的孩子；單克隆抗體的制備採用了動物細胞融合技術和動物細胞培養技術，故D正確．
故選：A．

7. 生物細胞融合技術有什麼應用

生物細胞融合技術有什麼應用
細胞工程是生物工程的一個重要方面.總的來說,它是應用細胞生物學和分子生物學的理論和方法,按照人們的設計藍圖,在細胞水平上進行的遺傳操作及進行大規模的細胞和組織培養.當前細胞工程所涉及的主要技術領域有細胞培養、細胞融合、細胞拆合、染色體操作及基因轉移等方面.通過細胞工程可以生產有用的生物產品或培養有價值的植株,並可以產生新的物種或品系.
一、基本操作
細胞工程的基本操作技術主要包括：
（1）無菌操作技術,細胞工程的所有實驗都要求在無菌條件下進行,所以實驗者必須十分認真細心地把好無菌操作這道關.
（2）細胞培養技術,細胞培養是指動物、植物和微生物細胞在體外無菌條件下的保存和生長.細胞培養技術包括取材除菌；配製培養基；對培養基除菌或滅菌；採用無菌操作進行接種；在培養室培養,並控制種類細胞生長所需的最佳培養條件,如溫度、濕度、光照、氧氣、二氧化碳等；當細胞達到一定生物量時應及時收獲或傳代；
（3）細胞融合技術,採取一定的措施誘導細胞同步化生長,對於成功地進行細胞融合及代謝物的生產具有十分重要的作用.

8. 細胞工程中，誘導細胞融合的方法有物理法、化學法，還有滅活的病毒，物理法的電激嫩不能寫成電擊

不能。
電擊是指電流通過人體或動物軀體而產生的化學效應、機械效應、熱效應及生理效應而導致的傷害。
電刺激是指以脈沖電流誘導細胞融合，不會對細胞造成傷害。

9. 細胞融合技術有何生物學醫學意義

細胞工程是生物工程的一個重要方面。總的來說，它是應用細胞生物學和分子生物學的理論和方法，按照人們的設計藍圖，在細胞水平上進行的遺傳操作及進行大規模的細胞和組織培養。當前細胞工程所涉及的主要技術領域有細胞培養、細胞融合、細胞拆合、染色體操作及基因轉移等方面。通過細胞工程可以生產有用的生物產品或培養有價值的植株，並可以產生新的物種或品系。

一、基本操作

細胞工程的基本操作技術主要包括：

（1）無菌操作技術，細胞工程的所有實驗都要求在無菌條件下進行，所以實驗者必須十分認真細心地把好無菌操作這道關。

（2）細胞培養技術，細胞培養是指動物、植物和微生物細胞在體外無菌條件下的保存和生長。細胞培養技術包括取材除菌；配製培養基；對培養基除菌或滅菌；採用無菌操作進行接種；在培養室培養，並控制種類細胞生長所需的最佳培養條件，如溫度、濕度、光照、氧氣、二氧化碳等；當細胞達到一定生物量時應及時收獲或傳代；

（3）細胞融合技術，採取一定的措施誘導細胞同步化生長，對於成功地進行細胞融合及代謝物的生產具有十分重要的作用。

二、分類

根據設計要求，按照需要改造的遺傳物質的不同操作層次，可細胞工程學分為染色體工程、染色體組工程、細胞質工程和細胞融合工程等幾個方面。

(1)染色體工程 染色體工程是按人們需要來添加或削減一種生物的染色體，或用別的生物的染色體來替換。可分為動物染色體工程和植物染色體工程兩種。動物染色體工程主要採用對細胞進行微操作的方法(如微細胞轉移方法等)來達到轉移基因的目的。植物細胞工程目前主要是利用傳統的雜交回交等方法來達到添加、消除或置換染色體的目的。

(2)染色體組工程 染色體組工程是整個改變染色體組數的技術。自從1937年秋水仙素用於生物學後，多倍體的工作得到了迅速發展，例如得到四倍體小麥，八倍體小黑麥等。

(3)細胞質工程 又稱細胞拆合工程，是通過物理或化學方法將細胞質與細胞核分開，再進行不同細胞間核質的重新組合，重建成新細胞。可用於研究細胞核與細胞質的關系的基礎研究和育種工作。

(4)細胞融合工程 是用自然或人工的方法使兩個或幾個不同細胞融合為一個細胞的過程。可用於產生新的物種或品系(植物上用得多，動物上用得少)及產生單克隆抗體等。其中單克隆抗體技術利用克隆化的雜交瘤細胞分泌高度純一的單克隆抗體，具有很高的實用價值，在診斷和治療病症方面有著廣泛的應用前途。

大規模的細胞培養可分為三個層次：單個細胞培養、組織培養和器官培養。植物細胞和原生質體培養技術可以用於育種，也可用於各類植物的快速繁殖，在培養無毒苗、長期貯存種子和生產次生代謝產物等方面發揮作用。動物細胞培養技術可用於製取許多有應用價值的細胞產品，如疫苗和生長因子等。利用細胞培養系統可進行毒品和葯物檢測；一些培養細胞可用於治療。

三、細胞工程的應用

（一）動物細胞工程的應用

1.在疫苗生產上的應用 疫苗是一種其主要成分具有免疫原性的蛋白質。它是利用動物細胞大規模培養技術生產的最成熟的一種產品。例如講乙型肝炎表面抗原基因插入哺乳動物細胞內進行高效表達，已生產出乙型肝炎疫苗。

2．在干擾素生產上的應用 干擾素是以一種在同種細胞上具有廣譜抗病毒活性的蛋白質，其活性的發揮受細胞基因組的調節和控制，涉及RNA和蛋白質的合成。

3.繁育優良品種 目前，人工受精、胚胎移植等技術已廣泛應用於畜牧業生產。精液和胚胎的液氮超低溫（ -196攝氏度）保存技術的綜合使用，使優良公畜、禽的交配數與交配范圍大為擴展，並且突破了動物交配的季節限制。另外，可以從優良母畜或公畜中分離出卵細胞與精子，在體外受精，然後再將人工控制的新型受精卵種植到種質較差的母畜子宮內，繁殖優良新個體。綜合利用各項技術，如胚胎分割技術、核移植細胞融合技術、顯微操作技術等，在細胞水平改造卵細胞，有可能創造出高產奶牛、瘦肉型豬等新品種。特別是幹細胞的建立，更展現了美好的前景。

4.臨床醫學與葯物 自1975年英國劍橋大學的科學家利用動物細胞融合技術首次獲得單克隆抗體以來，許多人類無能為力的病毒性疾病遇到了剋星。用單克隆抗體可以檢測出多種病毒中非常細微的株間差異，鑒定細菌的種型和亞種。這些都是傳統血清法或動物免疫法所做不到的，而且診斷異常准確，誤診率大大降低。

（二）植物細胞工程的應用

1. 在果樹園林花卉 林木生產實踐中應用細胞工程技術主要是微繁殖和去病毒技術。幾乎所有的果樹都患有病毒病，而且多是通過營養體繁殖代代相傳的。用去病毒試管苗技術，可以有效地防止病毒病的侵害，恢復種性並加速繁殖速度。近年來，對經濟林木組織培養技術的研究也受到很大的重視。採用這一技術可比常規方法提前數年進行大面積種植。特別是有些林木的種子休眠期很長，常規育種十分費時。植物細胞工程技術使現代花卉生產發生了革命性的變化。1960年，科學家首次利用微繁殖技術將蘭花的愈傷組織培養成植株後，很快形成了以組織培養技術為基礎的工業化生產體系——蘭花工業。現在，世界蘭花市場上有150多種產品，其中大部分都是用快速微繁殖技術得到的試管苗。從此，市場供應擺脫了氣候、地理和自然災害等因素的限制。

2.糧食與蔬菜生產 利用細胞工程技術進行作物育種，是迄今人類受益最多的一個方面。我國在這一領域已達到世界先進水平，以花葯單倍體育種途徑，培育出的水稻品種或品系有近百個，小麥有30個左右。在常規的雜交育種中，育成一個新品種一般需要8～10年，而用細胞工程技術對雜種的花葯進行離體培養，可大大縮短育種周期，一般提前2～3年，而且有利優良性狀的篩選。前面已介紹過的微繁殖技術，在農業生產上也有廣泛的用途，其技術比較成熟，並已取得較大的經濟效益。蔬菜是人類膳食中不可缺少的成分，它為人體提供必需的維生素、礦物質等。蔬菜通常以種子、塊根、塊莖、插扦或分根等傳統方式進行繁殖，化費成本低。但是，在引種與繁育、品種的種性提純與復壯、育種過程的某些中間環節，植物細胞工程技術仍大有作為。

3．在食品工業中的應用

A 生產香料 利用植物細胞大規模培養技術已能生產西多種香料物質。例如，在熱帶梔子花的細胞培養中產生的單萜葡萄苷、格尼帕甙和烏口樹甙的產量很高。

B 生產調料 利用植物細胞培養已能生產較多的天然調料，例如在甜葉菊的培養細胞中能積累甜菊苷，此物質是一種天然甜味劑，味道大約是製糖的300倍。

四.細胞工程的前景

細胞工程已經滲透到人類生活的許多領域，取得了許多具有開發性的研究成果，有的在生產中推廣，收到了明顯的經濟和社會效益。隨細胞工程技術研究的不斷深入，它的前景和產生的影響將會日益地顯示出來。

動物細胞培養工程發展的總方向是:大型化、自動化、精巧化、低成本、高細胞密度、高目的產品產量。具體地說,就是:

(1) 開發能高密度生長、能分泌大量目標產品的細胞系。這些細胞系應具有放大的目的基因或具有選擇性標記,從而可以保持對特定產物的表達。

(2) 開發細胞生長性能優良、解離細胞容易,並能重復使用的新型廉價微載體。

(3) 研製更大規模的高無菌條件的生物反應器和剪切力小、混合性能良好的新型攪拌系統。

(4) 將其它領域(諸如自動控制、感測器)的高精尖技術移植於細胞培養工程領域，以提高大規模培養的自動化、精巧化水平，並能更經濟地設計流加或灌注培養過程。

(5) 由於某些生長因子基因在導入哺乳動物細胞後，其表達產物有可能使細胞脫離血清生長，這一途徑對於今後的哺乳動物細胞基因工程有很大吸引力，並將推動無血清培養基的開發進入一個嶄新階段。

植物細胞工程技術是現代生物技術中發展比較成熟的技術,是植物改良的有效途徑和方法。隨著現代農業的不斷拓展,植物細胞工程技術應不斷開拓新的應用領域,如推動植物細胞工程技術與空間技術的結合,發展空間細胞融合技術,加強海洋生物技術的應用,利用植物細胞工程技術培育海藻新品種,生產海洋來源的植物功能產品,開拓植物細胞工程在環境保護中的應用等。

細胞工程作為科學研究的一種手段，已經滲入到生物工程的各個方面，成為必不可少的配套技術。在農林、園藝和醫學等領域中，細胞工程正在為人類做出巨大的貢獻。